作者：郭琛
作者单位：湖南农业大学
摘要：柑橘是世界第一大水果，长期以来，常规育种手段受到珠心胚干扰、性器官败育、育种周期长以及遗传上高度杂合等因素的影响，进程缓慢。近年来，不断完善的转基因技术为我们提供了一条快速直接品种改良的途径。本研究以枳的实生苗上胚轴为外植体，利用根癌农杆菌介导法转化phyB基因。成年态材料的转化可以有效地解决遗传育种童期漫长的难题。本研究以chit42基因为目标基因，以柑橘成年态节间茎段为外植体，研究了其再生和转化体系。主要研究结果如下： 1．优化了柑橘实生态上胚轴再生和转化体系，确定了MS附加1mg／L6-BA的培养基适合于枳壳的萌发；25天苗龄的外植体转化再生频率最高；筛选抗性芽的适宜卡那霉素浓度为75mg／L。试验共得到了27棵试管苗，经PCR检测证实，其中5棵外源基因phyB和nptⅡ均有特异带扩增。 2．研究了成年态节间茎段的再生转化体系，以切割成1cm长的材料，经过改良的消毒方法，灭菌效果最佳；以MS附加3mg／L的BA作为纽荷尔和冰糖橙不定芽的诱导培养基再生率最高；以MS附加1mg／LBA，0.5mg／L NAA作为椪柑不定芽的诱导培养基再生率最高。初期选择培养以卡那霉素的选择压浓度为30mg／L，后期再转入卡那霉素50mg／L的选择压下继续筛选。 3．通过茎尖嫁接来快速获得再生植株。纽荷尔、冰糖橙和桠柑均获得了转化抗性芽，纽荷尔的抗性芽通过嫁接，得到了三棵试管苗，经过过PCR检测证实，其中一棵外源基因nptⅡ有特异带扩增。
关键词：柑橘；遗传转化；实生苗上胚轴；成年态节间茎段；chit42基因；phyB基因
文献注录：郭琛. 柑橘转chit42和phyB基因的研究 [D]. . 2007.
报/刊名：《》，发表于2007
文献类型： [D]
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