作者：黄佳
作者单位：湖南农业大学
摘要：本试验运用组织培养的方法来繁殖转pthA-nls甜橙，摸索了转pthA-nls甜橙组织培养过程中的萌芽培养、增殖培养、生根培养及快繁苗遗传稳定性分析。其试验研究结果如下： 1、结合采前预处理找到了糖橙茎段的最佳消毒法：用75%酒精处理20s，10%的次氯酸钠消毒20min，无菌水冲洗4次后于室温下放置2d，再用10%次氯酸钠灭菌20min，用无菌水冲洗4次有效降低了半成年态糖橙的污染率，使成功率达到76.66%。 2、初步建立了普通甜橙的快繁体系。摸索出最佳培养基配方。最佳萌芽培养基为：MS+蔗糖30g/L+琼脂4.5g/L+6-BA3mg/L、最佳增殖培养基为：MS+ME1.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4.5g/L+NAA0.05mg/L+6-BA0.5 mg/L、最佳生根培养基为：1/2MS+AC2.0g/L+蔗糖20g/L+琼脂5.0g/L+IBA4 mg/L。通过对快繁苗进行不同炼苗时间的处理，得出炼苗时间为14d，成活率最高，达65%。 3、建立了转pthA-nls甜橙的快繁体系。找到了其萌芽、增殖、生根相对较适合的激素配比及浓度大小。最适萌芽培养基为：MS+蔗糖30g/L+琼脂4.5g/L+6-BA3mg/L;最适增殖培养基为：MS+ME 1.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4.5g/L+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L;最适生根培养基为：1/2MS+AC 2.0g/L+蔗糖20g/L+琼脂5.0g/L+ IBA 3.0 mg/L。成功培育出一批快繁苗。 4、对随机抽取的9株快繁苗进行PCR检测，结果显示都能够用设计的特异引物扩增出pthA-nls目的条带。证明转pthA-nls甜橙快繁苗均为转基因植株。 5、运用SRAP标记技术对转pthA-nls甜橙进行遗传稳定性分析，结果证明，转基因快繁苗没有发生变异，可以稳定遗传母体的性状。
关键词：柑橘, pthA-nls, 组培, 快速繁殖, 遗传稳定性
文献注录：黄佳. 转pthA-nls甜橙的快速繁殖及其快繁植株遗传稳定性的分析 [D]. . 2010.
报/刊名：《》，发表于2010
文献类型： [D]
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