作者：王宁,谷守芹,范永山,李坡,王文秀,董金皋
摘要：【目的】构建玉米大斑病菌STK1原核表达载体并进行表达,以期得到带有His标签的目的蛋白。
【方法】根据GenBank中STK1(AY849317)的cDNA序列及原核表达载体pET28a(+)中的多克隆位点设计引物,进行STK1的克隆和原核表达载体的构建。将重组载体在原核表达体系中进行表达。通过SDS-PAGE电泳鉴定蛋白的表达,并利用Western blot技术验证该蛋白是否为目的蛋白。
【结果】STK1在大肠杆菌中的表达主要以包涵体形式存在;蛋白的分子量约为40.8kD;经1mmol·L-1 IPTG在37℃下诱导,9h后蛋白产量达到最高;经Western blot检测该表达产物具有His-6抗原性。
【结论】玉米大斑病菌MAPK信号转导途径中的STK1在大肠杆菌中获得了表达,为今后STK1蛋白的多克隆抗体制备及功能研究奠定基础。
关键词：玉米大斑病菌;STK1;原核表达;His-6标签蛋白;
文献注录：王宁,谷守芹,范永山,李坡,王文秀,董金皋. 玉米大斑病菌STK1原核表达载体的构建及其表达 [J]. 中国农业科学. 2010, 18: 3876-3881.
报/刊名：《中国农业科学》，发表于2010 / 第 18 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
页码：第 3876-3881 页 / 共6 页