作者:代文君,王洪梅,刘晓,高运东,于力,王立群,仲跻峰,何洪彬
摘要:【目的】构建口蹄疫病毒VP1基因重组慢病毒载体FG9-VP1,并建立稳定表达VP1基因的BHK-21细胞系。
【方法】采用RT-PCR技术从口蹄疫病毒材料中扩增出VP1基因,并将其连入慢病毒载体FG9中,经PCR、酶切和测序鉴定正确后,转染BHK-21细胞,96h后经流式细胞分选筛选GFP阳性细胞,细胞增殖后经WB检测VP1基因的表达。
【结果】VP1基因重组慢病毒载体FG9-VP1测序正确,转染BHK-21细胞经流式细胞仪筛选的GFP阳性细胞后可稳定表达VP1基因。
【结论】VP1基因重组慢病毒载体构建成功并获得了稳定表达VP1基因的BHK-21细胞系。
关键词:口蹄疫病毒;VP1;转染;稳定细胞系;
文献注录:代文君,王洪梅,刘晓,高运东,于力,王立群,仲跻峰,何洪彬. 口蹄疫病毒VP1基因重组慢病毒载体的构建及VP1基因稳定表达细胞系的建立 [J]. 中国农业科学. 2010, 16: 3455-3460.
报/刊名:《中国农业科学》,发表于2010 / 第 16 期。
文献类型: [J] (文献级别:核心刊物)
页码:第 3455-3460 页 / 共6 页