作者：张姝,王敏,韩梅琳,陈强,马荣才,高俊莲
摘要：【目的】HrpNEcc蛋白是一种起细胞信号作用的蛋白激发子,通过激活植物遗传系统的多基因表达调控,诱导植物的广谱抗病性、驱虫性和抗逆性,促进植物生长发育,因此在农业生产中具有重要意义。在hrpNEcc重组大肠杆菌高密度发酵廉价诱导剂的筛选工作中,偶然发现不添加任何外源诱导剂的TB培养基对照处理也有HrpNEcc蛋白合成。本研究旨在找出引起对照处理中HrpNEcc蛋白合成的诱导因子,并研究诱导因子的来源和含量对HrpNEcc蛋白合成的影响。
【方法】摇瓶发酵培养重组大肠杆菌,离心收集菌体,用考马斯亮蓝染色法测定菌体总蛋白,SDS-PAGE检测目的蛋白条带,并结合Bandscan软件计算出HrpNEcc蛋白含量。
【结果】在不添加任何外源诱导剂的情况下,用TB培养基发酵生产重组大肠杆菌E.coliBL21(DE3)/pET30a(+)hrpNEcc,HrpNEcc蛋白最高产量可达301.45mg·L-1,比在IPTG诱导下,用LB培养基发酵生产的HrpNEcc蛋白产量提高72.43%。进一步研究证实,TB培养基中的酵母提取物(yeast extract)含有某些诱导因子能够诱导hrpNEcc基因表达合成HrpNEcc蛋白,并且hrpNEcc的表达水平随酵母提取物来源和浓度的不同而存在较大差异。
【结论】在不添加任何外源诱导剂的情况下,高含量的酵母提取物诱导重组大肠杆菌hrpNEcc表达合成HrpNEcc蛋白,但其诱导机制还有待进一步研究。
关键词：诱导;hrpNEcc;蛋白合成;生物农药;
文献注录：张姝,王敏,韩梅琳,陈强,马荣才,高俊莲. 酵母提取物诱导重组大肠杆菌合成HrpNEcc蛋白的研究 [J]. 中国农业科学. 2009, 11: 3880-3887.
报/刊名：《中国农业科学》，发表于2009 / 第 11 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
页码：第 3880-3887 页 / 共8 页