作者：黄娟,姜平,李玉峰,蒋文明
摘要：【目的】通过靶向PRRSV基因组中的M基因的siRNA来抑制PRRSV在Marc145细胞中的复制。
【方法】构建4个能转录小发夹RNA(shRNA)的质粒,将其与靶蛋白表达质粒共转染HEK293A细胞,观察荧光或进行半定量PCR;或将其转染Marc145细胞,感染PRRSV后进行IFA、TCID50和实时PCR检测。
【结果】shRNA表达质粒对M融合蛋白表达的抑制率约为50%,使M真核质粒表达蛋白的mRNA水平降低54%～64%,表达的shRNA在PRRSV感染后48h使病毒的TCID50和mRNA水平均降低到1/10～1/100倍,间接免疫荧光结果表明shRNA表达质粒转染孔的荧光细胞数显著减少。
【结论】shRNA表达质粒特异性的抑制了靶蛋白M和PRRSV的复制,靶向PRRSV基因组M基因不同区域的siRNA可以作为控制该病毒传播的候选策略。
关键词：PRRSV;RNA干扰;M蛋白基因;
文献注录：黄娟,姜平,李玉峰,蒋文明. M蛋白基因shRNA抑制PRRSV在Marc145细胞中复制的研究 [J]. 中国农业科学. 2008, 01: 259-264.
报/刊名：《中国农业科学》，发表于2008 / 第 01 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
页码：第 259-264 页 / 共6 页