作者：郭志鸿,张金文,王蒂,陈正华
摘要：【目的】创造块茎高直链淀粉含量的转基因马铃薯材料。
【方法】采用RT-PCR技术分别克隆了马铃薯Sbe1基因CDS内300bp的片段SⅠ和Sbe2基因CDS内410bp的片段SⅡ,并将SⅠ和SⅡ顺序连接得到融合片段SⅢ;以载体pHANNIBAL和pART27为基础,构建具有SⅢ反向重复结构的植物表达载体pRNAiⅢ;采用农杆菌介导法转化马铃薯优良品种陇薯3号、甘农薯2号和大西洋。
【结果】获得了融合片段SⅢ,构建了以Sbe1基因和Sbe2基因为靶标的RNA干扰载体pRNAiⅢ,通过农杆菌介导法获得了24个转基因株系,其中21个转基因株系试管薯的淀粉粒形态发生明显变化,表观直链淀粉含量介于59.31%～87.14%,比受体材料平均高出3.2倍。RT-PCR分析表明,在8个直链淀粉含量超过80%的转基因株系中检测不到Sbe1和Sbe2基因mRNA的积累。
【结论】采用RNAi技术通过沉默内源Sbe1和Sbe2,可获得高直链淀粉含量的马铃薯材料。
关键词：马铃薯;高直链淀粉;RNA干扰技术;淀粉分支酶基因;
文献注录：郭志鸿,张金文,王蒂,陈正华. 用RNA干扰技术创造高直链淀粉马铃薯材料 [J]. 中国农业科学. 2008, 02: 494-501.
报/刊名：《中国农业科学》，发表于2008 / 第 02 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
页码：第 494-501 页 / 共8 页