作者：祁小乐,高宏雷,高玉龙,邓小芸,步志高,王晓燕,王笑梅
摘要：【目的】建立高效鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)拯救平台,为深入研究该病毒基因组的结构与功能奠定基础。
【方法】在IBDVGt株全基因组中引入分子标签(A节段:EcoR V酶切位点;B节段:PstI酶切位点)。在基因组两端分别引入锤头状核酶结构(HamRz)和丁肝病毒核酶结构(HdvRz)。将带有分子标签和核酶结构的IBDV基因组插入载体pCAGGS的β肌动蛋白启动子下游,构建IBDV感染性克隆pCAGGmGtAHRT和pCAGGmGtBHRT,LipofectamineTM2000介导共转染DFI细胞,进行病毒拯救研究。
【结果】构建的IBDV感染性克隆可在DFI、Vero/E6、Vero/P12等3种细胞上高效拯救出病毒。RT-PCR、间接免疫荧光、电镜等均检测到了拯救的IBDV,且存在分子标签。拯救毒在CEF上能产生特有的砂砾状CPE,且TCID50与亲本毒差异不显著,具有相似的生物学特征。
【结论】构建的RNA聚合酶ⅢBDV拯救系统高效、稳定、简便、经济,且具有良好的细胞普适性。
关键词：传染性法氏囊病病毒;感染性分子克隆;病毒拯救;分子标签;核酶;
文献注录：祁小乐,高宏雷,高玉龙,邓小芸,步志高,王晓燕,王笑梅. 鸡传染性法氏囊病病毒Gt株感染性分子克隆的构建 [J]. 中国农业科学. 2007, 10: 2343-2349.
报/刊名：《中国农业科学》，发表于2007 / 第 10 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
页码：第 2343-2349 页 / 共7 页