作者：李玉保,鲍恩东,王志亮,赵茹茜
摘要：目的探讨应激时热休克蛋白mRNA转录水平的变化。方法根据HSP90、HSP70和GAPDHmRNA序列,设计并合成引物,将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体,重组质粒经筛选、鉴定,体外转录出RNA,梯度稀释作为阳性模板,用于标准曲线的制定和样品检测,建立了一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台,并用于检测长途运输猪心脏和肝脏中HSP70及HSP90mRNA转录水平的改变。结果经1、2、4、6和10h的运输应激后,组织中HSP70mRNA的转录水平随着运输应激时间的延长一直呈现出上升的趋势,运输应激到10h时HSP70mRNA的转录水平升到最高,肝脏和心脏组织中HSP70mRNA的转录水平分别为对照组的2.5和4.1倍;HSP90mRNA的转录水平则随着运输应激时间的延长呈下降趋势。结论运输应激可以影响HSPmRNA转录水平的变化,并且对不同家族的HSPmRNA转录水平的影响不同;HSP70mRNA的转录水平有望成为猪运输应激的判定指标之一。
关键词：猪;热休克蛋白;SYBRGreenI;荧光定量PCR;运输应激;
文献注录：李玉保,鲍恩东,王志亮,赵茹茜. 荧光定量RT-PCR法检测运输应激猪热休克蛋白mRNA转录水平 [J]. 中国农业科学. 2006, 01: 187-192.
报/刊名：《中国农业科学》，发表于2006 / 第 01 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
页码：第 187-192 页 / 共6 页