作者：徐璐,范学政,王琴,蒋春燕,宁宜宝,王泰健
摘要：目的对猪瘟病毒石门株E2基因进行原核表达,以期获得可溶性表达产物,为检测猪瘟抗体的ELISA试剂盒的研制奠定基础。方法用PCR技术扩增了重组S21质粒载体上的猪瘟病毒石门株E2基因的4个主要抗原结构域ABCD,A1A2,B和C。分别将4个片段克隆于pMAL-p2X载体中,经PCR、双酶切和测序鉴定,E2基因的4个主要抗原结构域片段的位置、大小和读码框均正确。将4个片段分别转化到表达菌TB1、BL21、BL21-CodonPlus(DE3)-RP和BL21(DE3)中,共得到16株重组表达菌,用IPTG进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析。结果E2基因的4个主要抗原结构域均可在这4种表达菌中表达,但以BL21-CodonPlus(DE3)-RP的表达效果最好,可表达出可溶性并且产量较高的目的蛋白。免疫印迹结果表明,表达的目的蛋白可以被猪瘟阳性血清和针对E2蛋白的单克隆抗体所识别。结论只表达目的基因的抗原结构域,可以缩短表达片段的长度,有利于获得可溶性目的蛋白,并且具有良好的血清学反应的特异性。
关键词：猪瘟病毒;E2基因;抗原结构域原核表达;
文献注录：徐璐,范学政,王琴,蒋春燕,宁宜宝,王泰健. 猪瘟病毒石门株E2基因4个抗原结构域的原核表达 [J]. 中国农业科学. 2006, 04: 814-818.
报/刊名：《中国农业科学》，发表于2006 / 第 04 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
页码：第 814-818 页 / 共5 页