作者：姜永萍,张洪波,步志高,李呈军,赵有淑,王秀荣,于康震,陈化兰
摘要：目的将A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因插入鸡β-actin启动子高效真核表达载体pCAGGS,构建了DNA疫苗质粒pCAGGHA5,以提高H5亚型禽流感DNA疫苗的表达水平和免疫保护效果。方法将pCAGGHA5和表达GD/1/96(H5N1)HA基因的质粒pCIHA5通过间接免疫荧光法和Western-blot分析检测转染293T细胞后瞬时表达的HA抗原蛋白,随之将pCAGGHA5及pCIHA5分别以100μg和10μg剂量一次免疫3周龄SPF鸡,4周后用100LD50的HPAIVGD/1/96(H5N1)鼻腔途径进行攻击。结果间接免疫荧光法和Western-blot分析表明2种表达质粒均可正确表达H5亚型HA抗原蛋白,载体pCAGGS表达水平显著高于载体pCI;免疫SPF鸡后,100μgpCAGGHA5可形成5/5的免疫保护,100μgpCIHA5可形成2/4的免疫保护,10μgpCAGGHA5可形成对免疫鸡5/5的免疫保护,而10μgpCIHA5则基本不能形成免疫保护,pCAGGHA5诱导的HI抗体水平远远高于pCIHA5。结论鸡β-actin启动子表达载体pCAGGS可显著提高HA基因体外表达水平和H5亚型禽流感DNA疫苗诱导的保护性抗体免疫反应水平,增强免疫保护效果。
关键词：禽流感;H5亚型;鸡β-actin启动子;DNA疫苗;免疫保护;
文献注录：姜永萍,张洪波,步志高,李呈军,赵有淑,王秀荣,于康震,陈化兰. 表达载体pCAGGS显著增强禽流感DNA疫苗的免疫保护效果 [J]. 中国农业科学. 2006, 04: 825-830.
报/刊名：《中国农业科学》，发表于2006 / 第 04 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
页码：第 825-830 页 / 共6 页