作者：李贺,代红艳,张志宏,高秀岩,杜国栋,张馨宇
摘要：目的病毒核酸分离是病毒基因组解析的基础,本研究旨在建立草莓病毒的dsRNA分离方法,获得草莓主要病毒的部分基因组序列。方法采用改进的dsRNA分离方法,对草莓病毒指示植物和栽培品种中的病毒dsRNA进行分离,通过琼脂糖凝胶电泳和RT-PCR来鉴定。结果不同草莓品种中病毒dsRNA的含量不同,试管苗叶片中dsRNA含量高于露地苗幼叶,而露地苗幼叶中dsRNA含量明显高于完全成熟叶。dsRNA对DNaseⅠ具有很强的耐性;当酶解缓冲液中含0.5mol·L-1NaCl时,dsRNA对RNaseA具有较强的耐性。利用DNA凝胶回收试剂盒,能够有效回收凝胶中的dsRNA片段。应用RT-PCR技术,从凝胶回收的dsRNA及DNaseⅠ/RNaseA两酶酶解处理后的dsRNA中分别扩增出草莓斑驳病毒和草莓轻型黄边病毒的特异片段。结论建立了从草莓植株中分离和鉴定病毒dsRNA的完整技术体系,为草莓病毒中国分离物的基因组解析奠定了重要基础。
关键词：草莓;dsRNA;病毒;分离;RT-PCR;
文献注录：李贺,代红艳,张志宏,高秀岩,杜国栋,张馨宇. 草莓植株中病毒dsRNA的分离和鉴定 [J]. 中国农业科学. 2006, 01: 145-152.
报/刊名：《中国农业科学》，发表于2006 / 第 01 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
页码：第 145-152 页 / 共8 页