作者：张建峰,侯加法,张皎,姚静
摘要：应用RT-PCR方法对雏鸡肝脏总RNA中鸡类胰岛素生长因子Ⅰ基因cDNA进行扩增,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,测序结果表明,与已知序列同源性为100%。然后将特异性片段连在pRLC载体上进行表达,经Tricine-SDS-PAGE分析,原核表达产物为7.6kD的重组蛋白,占菌体总蛋白的23%,Western印迹表明重组蛋白具有IGF-Ⅰ抗原活性。表达产物以包涵体形式存在,经7mol·L-1盐酸胍的变性液溶解及0.5mol·L-1精氨酸复性液处理,表达产物随后进行脱盐、凝胶层析纯化、MTT法分析其对NIH3T3和鸡胚成骨细胞的增殖效应,结果表明重组鸡IGF-Ⅰ具有较高的生物学活性。
关键词：鸡;类胰岛素生长因子Ⅰ基因;原核表达;MTT法;
文献注录：张建峰,侯加法,张皎,姚静. 鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究 [J]. 中国农业科学. 2005, 10: 2129-2133.
报/刊名：《中国农业科学》，发表于2005 / 第 10 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
页码：第 2129-2133 页 / 共5 页