标题:猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I基因的克隆、表达及其ELISA检测方法的建立

作者:刘建杰,何启盖,陈焕春,吴斌,徐晓娟,刘军发,唐先春,贝为成

摘要:根据胸膜肺炎放线杆菌S4 0 74菌株毒素I的序列 ,设计了 1对引物 ,从本室自己分离的菌株中扩增了猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I的结构基因 (apxICA) ,扩增的DNA片段大小为 36 4 0bp(4 6 87~ 832 6bp) ,将其克隆到pMD18 T载体中 ,酶切鉴定和序列测定后 ,进一步将其插入pET 2 8a中构建了原核表达载体 ,SDS PAGE和Westernblotting分析表明 ,该基因在大肠杆菌BL2 1(DE3 )中获得了表达 ,而且表达的蛋白质具有免疫学活性。利用表达的蛋白作为抗原包被酶标板 ,建立了检测毒素I血清抗体的ELISA方法。临床应用表明 ,该方法可用于APP强毒株感染的检测

关键词:猪胸膜肺炎放线杆菌;apxICA基因;克隆;原核表达;ELISA;

文献注录:刘建杰,何启盖,陈焕春,吴斌,徐晓娟,刘军发,唐先春,贝为成. 猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I基因的克隆、表达及其ELISA检测方法的建立 [J]. 中国农业科学. 2004, 01: 148-151.

报/刊名:中国农业科学》,发表于2004 / 第 01 期。

文献类型: [J] (文献级别:核心刊物

页码: 148-151 页 / 共4

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