作者：吴丹,童光志,仇华吉,薛强,周艳君,李景鹏
摘要：根据猪细小病毒 (porcineparvovirus ,PPV)NADL 2株非结构蛋白基因NS1序列设计引物 ,扩增出了PPVSY 99株的NS1基因 ,将其克隆到原核表达载体pET2 8a中 ,得到重组质粒SYNS1/pET2 8a。将SYNS1/pET2 8a转化到大肠杆菌BL2 1(DE3)中 ,经IPTG诱导 ,使PPVNS1基因获得了表达 ,运用ELISA和Westernblotting证实了表达产物的特异性。经表达产物细胞定位分析 ,表达的NS1蛋白是以包涵体的形式存在于大肠杆菌中。通过改变诱导时间或诱导剂IPTG的浓度 ,确定了表达NS1蛋白的最佳诱导条件 :IPTG终浓度为 0 .6mmol·L-1,诱导时间为 3h ,在大肠杆菌中最高表达含量为 17.8%。亲和层析后 ,得到了纯化的NS1蛋白 ,在Westernblotting检测中 ,纯化蛋白大大降低了反应背景。表达的NS1蛋白可作为免疫诊断试剂来检测PPV的发生 ,而且还可用于鉴别灭活疫苗免疫猪和自然感染猪
关键词：猪细小病毒;NS1;
文献注录：吴丹,童光志,仇华吉,薛强,周艳君,李景鹏. 猪细小病毒SY-99株非结构蛋白NS1基因的克隆与原核表达 [J]. 中国农业科学. 2003, 11: 1352-1356.
报/刊名：《中国农业科学》，发表于2003 / 第 11 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
页码：第 1352-1356 页 / 共5 页