作者：李小玲,刘斌,但现龙,王大鹏,周敏,史贤明
摘要：【目的】研制一种能有效指示假阴性的PCR检测产品,用于沙门氏菌快速、准确、灵敏的检测。
【方法】针对沙门氏菌invA基因、stn基因序列分别设计引物与扩增内标,建立添加扩增内标的沙门氏菌PCR检测方法,组装试剂盒,并对试剂盒的各项性能进行评价。
【结果】试剂盒对147株沙门氏菌和28株非沙门氏菌的检测结果显示,所有沙门氏菌均能扩增出362 bp的目标条带,非沙门氏菌仅扩增出520 bp的内标条带。试剂盒检测沙门氏菌基因组DNA的检测限为8.0 fg/PCR,检测染菌量为4—5 CFU/10 mL的牛奶样品,增菌8—10 h即得到阳性结果。反复冻融60次或-20℃下贮存1年,均不影响试剂盒的使用效果。对食品样品的检测结果显示,阳性检出率为2/30,与国标法的检测结果相符,比未添加扩增内标的PCR检测结果(阳性检出率为1/30)准确。
【结论】采用添加扩增内标的PCR试剂盒检测沙门氏菌,特异性强、灵敏度高、稳定性好,并能有效指示假阴性,提高检测的准确性,适用于食品中沙门氏菌的快速筛检。
关键词：沙门氏菌;聚合酶链式反应(PCR);扩增内标;检测试剂盒;
文献注录：李小玲,刘斌,但现龙,王大鹏,周敏,史贤明. 沙门氏菌内标PCR快速检测试剂盒的研制与应用 [J]. 中国农业科学. 2011, 16: 3395-3402.
报/刊名：《中国农业科学》，发表于2011 / 第 16 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
页码：第 3395-3402 页 / 共8 页