作者：张鑫,曹志艳,刘士伟,郭丽媛,董金皋
摘要：【目的】利用RNA干扰技术探讨玉米大斑病菌聚酮体合成酶基因StPKS的功能。
【方法】将玉米大斑病菌StPKS基因片段连接到pSilent-1载体中,构建StPKS的RNA干扰载体pSilent-StPKS1-2。利用聚乙二醇(PEG)介导的方法将之转入玉米大斑病菌野生型菌株01-23的原生质体中,通过潮霉素筛选得到转化子,采用半定量RT-PCR方法分析转化子中StPKS的表达情况,显微观察转化子与野生型菌丝形态的差异。
【结果】本研究构建了StPKS RNA干扰载体并进行了成功转化,经潮霉素抗性筛选和PCR验证最终获得了9个阳性转化子,其中5个转化子菌落颜色变浅。对转化子进行半定量PCR分析发现,5株转化子的StPKS表达量均有所下降;黑色素产量显著降低;菌丝呈不规则状,发生了膨大、变形、分枝等现象。
【结论】StPKS在DHN黑色素合成途径中起作用,其表达量下降会减少黑色素的产生。
关键词：玉米大斑病菌;聚酮体合成酶基因;DHN黑色素;RNA干扰;
文献注录：张鑫,曹志艳,刘士伟,郭丽媛,董金皋. 玉米大斑病菌聚酮体合成酶基因StPKS功能分析 [J]. 中国农业科学. 2011, 08: 1603-1609.
报/刊名：《中国农业科学》，发表于2011 / 第 08 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
页码：第 1603-1609 页 / 共7 页