作者：杨娇馥,史偈君,梁燕,郑旭,张涛,秦毅,王志钢,刘东军
摘要：【目的】克隆内蒙古白绒山羊AKT基因cDNA并分析其基本表达模式。
【方法】RT-PCR克隆AKT基因cDNA。通过在线软件BLAST进行核酸序列分析,用SMART与Psite进行氨基酸序列分析。半定量RT-PCR检测AKT基因在绒山羊组织中的表达特异性。Western blotting检测绒山羊胎儿成纤维细胞中AKT表达。
【结果】克隆到的内蒙古白绒山羊AKT基因cDNA片段长1 443 bp,包含了编码480个氨基酸残基的全长ORF,氨基酸序列与绵羊（NM001161857.1）同源性为97%。SMART分析表明,ORF编码的蛋白包含了可与3-磷酸肌醇结合的PH结构域及具有丝氨酸/苏氨酸激酶催化活性的STKc结构域。Psite分析表明,含有1个cAMP-/cGMP-依赖性蛋白激酶磷酸化位点、6个蛋白激酶C磷酸化位点、10个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、2个蛋白激酶ATP结合区信号和1个丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性区域。PSORT程序预测其定位于细胞质中。AKT基因mRNA丰度在睾丸、脑和肾中较高,在脾、肝、肺及乳腺组织中相对低。绒山羊胎儿成纤维细胞中抑制mTOR活性,AKT表达量降低。
【结论】内蒙古白绒山羊AKT基因cDNA全长ORF的核苷酸序列与绵羊的AKT基因具有很高的同源性,AKT基因在脾、睾丸、脑、肝、肺、乳腺及肾组织中均有表达,其AKT的表达受mTOR信号通路的调控。
关键词：内蒙古白绒山羊;AKT;基因克隆;表达模式分析;
文献注录：杨娇馥,史偈君,梁燕,郑旭,张涛,秦毅,王志钢,刘东军. 内蒙古白绒山羊蛋白激酶B/AKT基因的克隆及表达模式分析 [J]. 中国农业科学. 2011, 13: 2787-2795.
报/刊名：《中国农业科学》，发表于2011 / 第 13 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
页码：第 2787-2795 页 / 共9 页