作者:刘小丰,彭爱红,许兰珍,邹修平,朱世平,赵晓春,陈善春
作者单位: 中国农业科学院柑桔研究所,西南大学柑桔研究所
摘要:早期、无损伤、易于操作的阳性芽检测技术,对提高柑橘遗传转化效率是十分有利的。本文设计和构建了nptⅡ::mgfp5融合基因,通过锦橙上胚轴转化体系研究其在柑橘遗传转化中的作用。nptⅡ::mgfp5融合基因全长1 578 bp,编码525个氨基酸,作为表达载体p1301NG的选择标记和报告基因。通过农杆菌介导法转化锦橙上胚轴,再生培养1周后用体式荧光显微镜观察外植体的再生情况。在再生培养第9天时即观察到GFP荧光再生芽的形成,再生培养后10~15 d是GFP再生芽形成的高峰期。GUS染色和PCR分子检测结果证明,GFP荧光检测结果是真实可靠的。研究结果表明:nptⅡ::mgfp5融合基因能够在再生培养早期筛选到阳性转化芽,有助于提高阳性转化芽的存活率,提高柑橘遗传转化效率。
关键词:nptⅡ::mgfp5融合基因,柑橘遗传转化,GFP荧光,转化效率
文献注录:刘小丰,彭爱红,许兰珍,邹修平,朱世平,赵晓春,陈善春. nptⅡ::mgfp5融合基因的构建及其在柑桔遗传转化中的应用 [J]. . 2013, 07: 1282-1287.
基金: 重庆市自然科学基金项目(No.CSTC,2010BB1153);现代农业技术体系资助项目(No.CARS-27)
报/刊名:《》,发表于2013 / 第 07 期。
文献类型: [J]
页码:第 1282-1287 页 / 共6 页