作者：李芳 ，邓子牛， 赵亚 ，李大志， 戴素明
作者单位：湖南农业大学园艺园林学院;国家柑橘改良中心长沙分中心;
摘要：基于转化病毒基因介导抗性,通过在植物表达载体p CAMBIA 2301上插入启动子–内含子–终止子的方式,构建一种含有发夹结构的、通用型强的RNAi载体骨架结构;以柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)的p25、p20和p23基因保守序列为模板设计正向片段和反向片段,先后与骨架载体连接,成功构建了3个RNAi载体(分别命名为ds2301–p25、ds2301–p20和ds2301–p23),并将载体ds2301–p23注射入墨西哥莱蒙叶片。制作p23基因的地高辛标记探针,用Northern杂交检测是否有si RNA产生。结果表明:用Northern杂交可以检测到p23特异的si RNA,在墨西哥莱蒙叶片中瞬时表达的农杆菌ds2301–p23可以发生RNAi,表达有效的si RNA。本研究中构建的骨架载体可以广泛用于RNAi载体的构建,含有柑橘衰退病毒基因片段的3个载体可以用于基因功能分析及具有CTV抗性的柑橘种质资源获得。
关键词：柑橘 ,柑橘衰退病毒 ,RNAi载体 ,载体构建
文献注录：李芳 ，邓子牛， 赵亚 ，李大志， 戴素明. 柑橘衰退病毒基因RNAi载体的构建 [J]. 湖南农业大学学报(自然科学版). 2016, 02: 140-144.
报/刊名：《湖南农业大学学报(自然科学版)》，发表于2016 / 第 02 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
页码：第 140-144 页 / 共5 页