作者:张印; 万勇; 张婷; 叶俊丽; 邓秀新
作者单位:华中农业大学园艺林学学院园艺植物生物学教育部重点实验室国家柑橘育种中心
摘要:类胡萝卜素裂解双加氧酶(CCD)可催化类胡萝卜素在特定位点氧化裂解生成多种生物活性化合物,其活性差异一定程度上决定了植物体内类胡萝卜素含量和组成变化。为了探讨柑橘中CCD1蛋白对类胡萝卜素积累的影响,从红肉脐橙(Citrus sinensis L. Osbeck)果实中克隆了CCD1基因,将其特异片段通过重组反应连接到pHGRV载体中,构建CCD1的RNA干扰载体pHGRV-CCD1。利用农杆菌介导的方法将其转入‘国庆1号’蜜柑、‘伏令夏橙’和‘马叙’葡萄柚愈伤组织中,经PCR鉴定分别获得6、4、4个转基因干扰系。3种柑橘材料转基因干扰系中CCD1基因的表达水平均较野生型显著下调,其中‘马叙’葡萄柚转基因干扰系Rm2的表达水平仅为野生型的8.4%,干扰效果最佳。CCD1转基因干扰系愈伤组织外观多数呈现与野生型对照相近的色泽,仅Rm2系可见较为明显的颜色变化;综合分析3种柑橘材料转基因前后类胡萝卜素含量变化,发现CCD1基因抑制表达后,紫黄质、9–顺式–紫黄质的含量均较野生型显著增加,表明其可能是CCD1在柑橘愈伤组织体内优先选择的裂解底物。
关键词:柑橘; 类胡萝卜素; 类胡萝卜素裂解双加氧酶; RNAi技术; 愈伤组织
文献注录:张印; 万勇; 张婷; 叶俊丽; 邓秀新. 柑橘愈伤组织RNAi沉默CCD1基因对其类胡萝卜素积累的影响 [J]. . 2020: 1982-1990.
报/刊名:《》,发表于2020
文献类型: [J]
页码:第 1982-1990 页 / 共 页