标题:CRISPR/Cas9介导柑橘CsLOB1基因启动子的多位点编辑

作者:邹修平, 范迪, 彭爱红, 何永睿, 许兰珍, 雷天刚, 姚利晓, 李强, 罗克明, 陈善春

作者单位: Cnki

摘要:为了获得CsLOB1启动子较大片段删除的突变体,利用CRISPR/Cas9技术对CsLOB1启动子进行多位点编辑。通过在CsLOB1启动子的EBEPthA4区域及其上、下游设计不同的靶标位点,构建了2个植物表达载体pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites,分别对CsLOB1启动子同时进行2个位点和3个位点的编辑。测序结果表明pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites的基因编辑效率分别为64.7%和80.0%,突变体植株在2个sgRNA之间发生了DNA片段的删除。进一步的分析发现,不同的sgRNA具有不同的突变效率,其差异是由于不同的sgRNA对CsLOB1-识别和结合能力的差异造成的。本结果表明对CsLOB1启动子进行多位点编辑可以获得删除较大DNA片段的突变体。
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关键词:柑橘 CRISPR/Cas9系统 CsLOB1 多位点 基因编辑

文献注录:邹修平, 范迪, 彭爱红, 何永睿, 许兰珍, 雷天刚, 姚利晓, 李强, 罗克明, 陈善春. CRISPR/Cas9介导柑橘CsLOB1基因启动子的多位点编辑 [J]. . 2019, 02: 337-344.

报/刊名:》,发表于2019 / 第 02 期。

文献类型: [J]

页码: 337-344 页 / 共8

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