作者：眭顺照,李名扬,蒋安,王洋,秦华,皮伟,任琛
摘要：目的构建蜡梅花cDNA文库,分析蜡梅脂转移蛋白基因的表达,为探索蜡梅冬季开花分子机理,分离克隆特色基因奠定基础。方法以蜡梅花器官为材料,用SMART cDNA Library Construction Kit构建文库,RT-PCR分析基因表达。结果经测定原始文库滴度达到1.4×106 pfu/ml,扩增总文库滴度约为1010pfu/ml,重组率达到96%,插入片段在0.5 kb以上,平均约1.1 kb,通过PCR检测,从总文库中检测到了表达丰度不同的蜡梅PI、AP3和LTP基因的特异片段,说明所构建的文库覆盖度高、代表性强,LTP基因具有内含子,而总文库中扩增出的LTP基因不含内含子,说明所构建的cDNA文库无基因组DNA污染,LTP基因在蜡梅开花各个时期均表现较高的转录水平,与EST分析时高频率出现LTP序列的情况相符,证实所构建的文库能够反映蜡梅开花过程基因表达的基本情况。结论已获得高质量的蜡梅花cDNA文库,可以用于进一步的基因克隆或EST测序分析,这是首次正式报道蜡梅cDNA文库的构建。LTP基因在蜡梅开花过程中可能具有重要的生物学功能,为探索蜡梅冬季开花分子机理提供了线索。
关键词：蜡梅;cDNA文库;脂转移蛋白基因;RT-PCR;
文献注录：眭顺照,李名扬,蒋安,王洋,秦华,皮伟,任琛. 蜡梅花cDNA文库构建及其高频出现脂转移蛋白cDNA的表达 [J]. 中国农业科学. 2007, 03: 644-648.
报/刊名：《中国农业科学》，发表于2007 / 第 03 期。
文献类型： [J] （文献级别：核心刊物）
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