作者:仇华吉,金吉东,田志军,周艳君,王云峰,童光志
摘要:用RT-PCR扩增并克隆了日本脑炎病毒弱毒株SA14-14-2的NS1、NS1’、NS1-2A的 cDNA片段,分别将其亚克隆到原核表达载体pET-30b(+),构建了重组原核表达质粒pET30b-NS1、pET30b-NS1’、pET30b-NS1-2A,转化大肠杆菌BL-21(DE3),用IPTG诱导培养。结果表明,仅有pET30b-NS1质粒转化的菌株获得表达,而另外2种重组质粒转化的菌株均无表达。表达的融合蛋白分子量约为46kD,约占菌体总蛋白的30.8%,Western blotting分析表明表达产物具有抗原活性。动物试验证实,重组NS1免疫小鼠蛋白可以抵抗强毒的攻击。笔者研究证实NS2A或部分NS2A的存在对于NS1的表达具有不利影响。
关键词:日本脑炎病毒;NS1;NS1’;RT-PCR;基因表达;
文献注录:仇华吉,金吉东,田志军,周艳君,王云峰,童光志. NS2A序列对日本脑炎病毒NS1基因在原核系统中的体外表达的影响 [J]. 中国农业科学. 2004, 04: 614-618.
报/刊名:《中国农业科学》,发表于2004 / 第 04 期。
文献类型: [J] (文献级别:核心刊物)
页码:第 614-618 页 / 共5 页